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新到细胞如何处理       一、先梳理细胞的基本信息如下:别称786-o; 786O; 786-0; 786.O; 786-O RCC; RCC 786-O; RCC_7860; RCC 7860; 7860; 786-0WT生长特性贴壁细胞细胞形态上皮细胞样冻存条件冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮培养方案生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1%...
2024-03-30
固定是指将各种组织浸入防腐剂内,使细胞内的物质为不溶性。固定组织的目的是设法得到接近正常生命状态的细胞结构。有人说“形态学的美是良好固定产物”,这说明固定的特殊重要作用。      二、固定目的       1.抑制自溶和腐败:新鲜组织如果不经固定,任意放置细胞内酶对蛋白质的分解,以及细胞孳生,则易因细菌繁殖而致组织腐烂。细胞内的蛋白质分解...
2024-03-23
EdU法细胞增殖功能检测       一、简介       EdU(5-Ethynyl-2'-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中,基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可直接并准确地检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复、病...
2024-03-15
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0. 2μm) 并独立生活的微生物,约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性,可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构,电镜下观察支原体膜为三层结构。其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。       二、支原体的...
2024-03-09
SDS在分子实验的作用       一、简介       SDS(十二烷基硫酸钠)是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白-SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷...
2024-02-24
克隆形成实验一、简介       当单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。其中细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。软琼脂克隆形成实验主要用于非贴壁生长的细胞,某些细胞(如正常成纤维细胞)在悬浮状态下不能增殖,不适用此法。某些恶性肿瘤细胞,不仅在贴壁状态下能增殖,在悬浮状态下也能增殖,其在软琼脂中形成克隆的能力反映了其恶性...
2024-02-01
Hoechst 33258染色一、简介       Hoechst 33258,也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式为C25H24N6O · 3HCl,分子量为533.88,索莱宝,C0021       Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 为特异性 DNA 染料,与 A-T 键结合,...
2024-01-27
CCK8实验一、简介       CCK-8细胞增殖检测试剂盒基于WST-8 (化学名: 2-(2-甲氧基.4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),能快速灵敏地检测细胞增殖和细胞毒性。WST-8属于MTT的升级产品,工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲瓒产物(formazan),其颜色的...
2024-01-20
免疫荧光染色(Immunofiuorescence,IF)的主要原理利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白,主要包括直接法和间接法。直接法是蛋白和标记荧光素一抗结合,间接法是蛋白和一抗结合,然后再与带有荧光基团的二抗识别,荧光显微镜下即可观察到荧光。二、试剂与材料1、生长于盖玻片的贴壁细胞2、封闭液(5%BSA/PBS)、抗体稀释液(1%BSA/PBS)...
2024-01-13
告别黑白条带,迎接五彩斑斓        谈起免疫印迹(Western Blot)检测,做科学研究的大家都知道,做蛋白机制研究都离不开WB检测,在过去我们的WB结果都是白底黑带,但是近年经常阅读SCI文献,发现很多高分影响因子文献的WB结果图发生很大的变化:白底变成了黑底,条带从黑色变成了:红,橙,黄,绿,蓝等各种颜色,条带亮度,对比度都很明显,不同蛋白还能呈现出不同颜色的条带,提高文章质量...
2024-01-06
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