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小鼠TNF - α 未包被酶联免疫吸附测定法       赛默飞未包被ELISA    货号88-7324       本小鼠TNF - α非包被酶联免疫吸附试验(ELISA)包含进行定量酶联免疫吸附试验(ELISA)所需的试剂、标准物、缓冲液和稀释剂。该ELISA试剂盒是专门设计的,用于精确地测量小鼠血清、血浆、组织匀浆、灌洗液和细胞培养上清等样本中的TNF - α蛋白水平。       ...
2023-12-02
当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像,通过比较图像以确定细胞迁移速率。       二、操作步骤       a. 用marke笔在6孔板背后均匀的划横线;       b. 取出细胞弃掉培养基,用PBS 清洗 2-...
2023-11-25
稳定转染(Stable transfected):外源DNA既可以整合到宿主细胞中,也可能作为一种游离体(episome)存在。       尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标记。如来氨丙基转移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素磷酸转移酶(HPH),...
2023-11-17
流式细胞术细胞周期实验       一、简介       细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应细胞增殖速度。碘化丙啶(Propidium iodide, PI)可插入碱基之间而与 DNA 结合,其对碱基几乎没有序列编好,每 4 - 5 个碱基对可结合一个染料分子。PI 也能与 RNA 结合,需要用核酸酶处理来区分 RNA 和 DNA ...
2023-11-02
       恶性肿瘤向邻近的组织侵犯称为侵袭。检测肿瘤侵袭能力判断肿瘤转移能力的一种方法。原理是Transwell小室置于24孔的培养板中,分为上下室,上室底部为-层聚碳酸酯膜,这层膜具有通透性,将上室培养液和含下室培养液隔开,但是肿瘤细胞可以通过,下室中的培养液(如血清中的趋化因子)可以吸引上室中的细胞。




二、操作步骤


1、迁移...
2023-10-21
Western Blot磷酸化蛋白攻略一、简介       细胞利用蛋白质的选择性磷酸化作用来调整细胞内诸多的生理加工过程。在靶蛋白的特定氨基酸序列模体上,蛋白激酶可将磷酸基偶联在酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸的残基上。该过程又可通过蛋白质磷酸酯酶逆转。蛋白激酶和蛋白磷酸酶可识别特定的模体和特定的蛋白质从而决定了其功能的特异性。大约10%或更多的蛋白质的磷酸化受到位点特异性调控细胞的调控可以开启或调...
2023-08-09
Western Blot大分子蛋白攻略一、样品制备       大分子量蛋白不好提取,因为很多大分子量蛋白是膜蛋白,膜蛋白属于非可溶性蛋白,且表达量通常较低,一般使用溶液法(RIPA等)裂解时,通常会丢失在不可溶组分中,所以要选择合适的方法来进行蛋白的提取或富集。提取总蛋白时建议适当延长裂解时间,有助于大分子量蛋白的充分裂解。二、SDS-PAGE电泳分离胶的使用及浓度       凝胶主要有...
2023-08-01
一、简介蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot,简称WB。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。Western Blot 印迹常用的转移膜主要是硝酸纤维素膜(NitrocelluloseBlotting M...
2023-07-22
一、简介AnnexinV是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白,可以与早期调亡细胞的胞膜结合,而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。AnnexinV与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由于在发生凋亡时,磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变,因此与DNA碎片检测比较,使用Annex...
2023-07-17
      人外周血淋巴细胞亚群是目前临床评估免疫功能的重要方法之一,随着疾病的发生发展,免疫微环境也随之发生相应变化,进而引起外周血中各种免疫细胞亚群的改变。相关试剂试剂名称厂家货号人外周血淋巴细胞分离液索莱宝P8610PBSBMCB00151640 RPMI培养基GibcoC11875500BT胎牛血清SigmaF8318细胞刺激试剂盒赛默飞00-4975-93Foxp3/转录因子固定...
2023-07-07
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